4.呼吸道病原体核酸检测结果解读及注意事项
4.1 常规核酸检测
常规核酸检测是序列依赖的核酸检测,只能扩增特异性引物所覆盖的核酸序列。随着多重核酸检测方法越来越多的使用,同一份标本中可能会同时检测出多种病原体,提示存在混合感染。临床医师需要结合不同病原体的季节流行特征、生物学特性和致病特点,核酸检测结果提示的病原体相对载量高低,患儿临床特征等进行综合分析,以明确哪一种病原体是主要病原体。
4.1.1 核酸检测阳性
上、下呼吸道标本的病原体核酸阳性结果在病*、细菌、非典型病原体及真菌感染中的诊断价值有差别。若核酸检测阳性结果与临床表现严重不符,要注意是否有引物的特异性差和实验室污染等方面的问题,另外,痰液也有被上呼吸道病原污染的可能,临床医师需及时与实验室方面沟通。
4.1.1.1 病*
急性期上或下呼吸道标本检测阳性,可提供病原学参考。由于部分病*存在较高的无症状感染率,故上呼吸道标本的阳性结果要结合临床综合考虑,下呼吸道标本的病原学诊断价值更大。
4.1.1.2 细菌
下呼吸道标本、血液等无菌体液标本核酸阳性检测结果具有诊断价值;百日咳鲍特菌主要感染鼻咽部,上呼吸道标本检测阳性具有诊断意义。
4.1.1.3 非典型病原体
上、下呼吸道标本核酸检测阳性,多数情况下对肺炎支原体、肺炎衣原体和*团菌等非典型病原体具有诊断价值,但下呼吸道标本结果更具有病原学价值。
4.1.1.4 真菌
下呼吸道标本、无菌体液、器官组织、鼻窦分泌物等标本真菌检测阳性结果,具有诊断价值。
4.1.2 核酸检测阴性
(1)结合患儿临床表现除外某种病原体感染。(2)若临床高度提示某种病原体感染,但核酸检测阴性,要考虑标本是否合格、病原体可能存在变异、试剂的检测阈值和质量以及实验室检测等方面的问题,临床医师要及时与实验室反馈和沟通。
4.2mNGS
mNGS的标准操作、数据分析、结果判读等尚无标准化流程,但随着mNGS技术在临床上的不断推广,国内临床和检验领域发布了一系列专家共识,对mNGS中存在的某些共性问题,尤其是结果报告和解读提出建议。mNGS病原检测结果可向临床提供有效的线索,但存在一定的局限性,建议由具有一定生物信息学知识,并从事临床感染或临床微生物等专业人员,结合患儿临床背景、影像学资料、其他实验室检查结果进行综合判断,避免盲目依据mNGS报告开展治疗,导致抗微生物药物的滥用。
4.2.1 报告内容
(1)报告病原体列表:建议按照细菌、病*、真菌和寄生虫等病原体类型以及临床